3D细胞培养基质胶-Col Tgel
Col Tgel 采用目前世界国际最先进的水凝胶技术
Col-Tgel产品介绍:
产品应用: (本产品仅供研究使用)Col-Tgel是一种凝固过程可控制的3D细胞培养基质胶,含有天然、变性的I型胶原蛋白肽段,为细胞附着和生长提供了一种细胞外环境。适用于肿瘤细胞、干细胞、原代细胞培养,以及裸鼠肿瘤接种的支撑。它提供了胶原骨架可以使细胞黏附并呈三维状态下生长,比起2D培养,更好的模拟了体内环境,同时可以通过添加生长因子、细胞因子、激素等优化3D 培养条件。
(适用于肿瘤细胞、干细胞、原代细胞培养等)
货号: P1720S-1(Soft, 1mL); 1625元 P1720S-10 (Soft, 10mL) 7960元
P1720M-1(Med, 1mL); 1625元 P1720M-10 (Med, 10mL) 7960元
P1720H-1(Stiff, 1mL); 1625元 P1720H-10 (Stiff, 10mL) 7960元
P1720SMH-3(Soft, Med, Stiff, 各1mL) 3990元
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组成
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数量
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P1720S-1
P1720M-1
P1720H-1
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P1720S-10
P1720M-10
P1720H-10
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P1720SMH-3
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保存
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组分 A
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1 mL
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2 mL ? 5管
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1mL ? 3管
(Soft,Med,Stiff
各1mL)
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4?C
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组分 B
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1管
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5管
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3管
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-20?C保存3个月
-80?C保存12个月
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保存方法:产品4?C运输。 组分 A存放于4?C,组分 B存放于-80?C。
保质期:组分A存放于4?C ,保质期为12个月
组分B(重悬溶解后)在-20?C可保存3个月,-80?C可保存7个月,粉末-80?C保存12个月
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本产品的优点在于
l 无免疫原性: 纯胶原,无其它杂质,如生长因子,激素等
? l 产品稳定:批次间差异极小,减少了干扰因素
? l 易于操作:室温操作,无需在冰上进行,人为控制凝胶过程
? l 节省时间:仅需3 步完成,全程不超过1 个小时
? l 便于观察:高透明度、可以显微镜观察、肿瘤观察。
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操作简单:仅3步、2小时
1. 将细胞(或组织块)与组分A混合
2. 加入组分B
3. 20μL/凝胶液滴,37℃培养。15-45min即可形成凝胶。Col-Tgel 主要3种应用方式。
室温操作,凝固条件可自控-加入组分B后才开始凝胶,并且根据加入B的量多少控制所需凝胶时间。(matrigel 冰上操作,很容易凝固、导致实验失败)
Col Tgel 的三种使用方式
? A.细胞种植于凝胶上生长。(适用于皮肤干细胞、成纤维细胞)
? B.细胞埋植于凝胶内生长。(适用于肿瘤细胞、原代神经细胞等)
? C.细胞(或组织)与凝胶混合,注射到动物体内,形成外源移植物。 (干细胞移植、肿瘤细胞移植,增加移植样品体内存活率)
Col-Tgel的主要成分及工作原理:
图1. Col-Tgel主要成分及工作原理。组分B转谷氨酰胺酶(TGase)催化 组分A胶原水解片段进行分子交联,形成凝胶。转谷氨酰胺酶(TGase)是经常使用的一种食品添加剂,例如在酸奶制作中能增加蛋白交联;胶原片段是细胞外基质成分。Col-Tgel成分明确,对于细胞、动物安全无毒,无免疫原性。
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特点:
1.Col Tgel 高度透明(Matrigel 为半透明)
2.Col Tgel 在体外细胞培养中的应用:3D培养光镜观察(Matrigel 不可以)
3.3D培养下的肿瘤异质性
4.Col Tgel 在体外细胞培养中的应用:
荧光标记、免疫荧光观察、病毒侵染、质粒转染等(Matrigel 做不到)
5.3D培养于2D培养中的细胞比较,分子表达谱完全不同
6.Col Tgel 在体外细胞培养中的下游应用:
7.Col Tgel 可以生物降解。安全无毒。(细胞分泌的MMP 就可以将其水解)
8.胰酶可以直接将Col Tgel 消化水解。
9.水解后释放的活细胞可以进行任何下游实验:
10. DNA、RNA、Protein、流式等检测……
11.肿瘤的异种移植(xenograft tumor) Col Tgel 减少组间差异,增加存活率
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3D细胞培养是未来的发展趋势
2D细胞培养很难反应真实的体内环境
2D 50%培养皿底、 50%培养基、2-3 %细胞间接触
3D 100%细胞-细胞间接触
很多2D模型实验结果与动物实验不符
3D细胞模型可以研究物理硬度压力对细胞的影响
软 肿瘤细胞快速增殖
中 瘤细胞中速增殖
硬 骨细胞分化 肿瘤细胞休眠
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